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产品简介
购买须知
| 产品名称 | Science：iRFP,一种近红外荧光蛋白，让我们能观察内部器官 |
| 商品货号 | TSPLA11193 |
| 商品信息 | Science：iRFP,一种近红外荧光蛋白，让我们能观察内部器官 叶史瓦大学Albert Einstein医学院研究人员首次研制出独特的荧光蛋白，科学家借助该蛋白质可清晰地观察活体的内部器官，因而摆脱外科手术的解剖刀和有辐射风险的成像技术。 肝细胞表达iRFP蛋白 这一新探针在全身成像领域具有突破性意义，它能让医生在监视肿瘤生长过程中不留下创伤，因而对癌症治疗效果的评估有积极作用。与人体扫描技术相比，荧光蛋白成像技术不涉及辐射风险和对比剂。研究结果发表在7月17日 Nature Biotechnology期刊的网络版上。 过去的20年，科学家尝试了水母和珊瑚的各种有色荧光蛋白用于显示细胞、细胞器和分子，但是荧光探针在哺乳动物体内的使用却存在挑战，动物血液中血红蛋白能高效地吸收蓝光、绿光、红光以及其它波长的光。荧光蛋白的激发光和荧光蛋白“亮起来”后的发射光都会受到血红蛋白的吸收干扰。 哺乳动物组织的透明度是由血红蛋白和黑色素的特性决定的,它们可以吸收650nm以下的大部分光,而水会吸收90nm以上波长的光。换句话说,650nm至900nm之间的波长基本上可不受阻碍地穿过动物和人体组织。因此对于深层脏器成像观察,可以考虑使用近红外荧光蛋白( ear-infrared fluorescent protein,iRFP,因为RFP的最大激发和发射波长分别为690nm和713nm。 Einstein医学院解剖与结构生物学副教授 Vladislav Verkhusha博士为了解决这一问题，他的实验室从细菌光敏色素（用于检测光）提取出荧光蛋白，这一荧光蛋白（称为iRFP）能吸收和发射电磁频场的近红外光，该频段的光对于哺乳动物组织而言几乎是透明的。 研究人员把荧光蛋白定位在肝脏中，这一器官由于血液含量高很难被观察。 含有iRFP基因的腺病毒颗粒注入小鼠体内。一旦载有iRFP基因的病毒感染肝细胞，感染细胞会表达该基因并合成iRFP蛋白质。接着，小鼠暴露在近红外光下，全身成像仪能观察到发射荧光的肝脏。最早在感染后的第2天检测出肝脏发荧光，5天后，荧光强度达到峰值。附加实验表明，iRFP蛋白质对哺乳动物没有毒害作用。 论文的第1作者Grigory Filonov博士是 Einstein 医学院 Verkhusha 实验室的一个成员。他说，据研究所知，iRFP蛋白在活体肝脏显示方面优于其它荧光蛋白，它不仅产生非常明亮的图像，而且长时期内保持很高的稳定性。我们相信它将在全身无创成像领域具有广阔的应用。 Filonov博士还说，与标准x-光和CT扫描相比，荧光蛋白成像没有辐射风险。此外，iRFP 蛋白成像很清晰，不需要对比剂，而核磁共振成像（MRI）需要吞下或注射对比剂以使得机体内部结构更清晰。（生物探索译 Pobee） |
| 使用说明 | 质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必先转化提质粒后使用）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒; ②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作） ③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min; ④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子） ⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另外不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态); ⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。 |
