原代细胞分离试剂盒III

原代细胞分离试剂盒IIl

产品说明书

 

一、适用于

骨骼肌细胞、平滑肌细胞、心肌细胞、等等。

 

二、试剂盒组成（4^oC保存）

1、Buffer A：     50ml × 1     

2、Buffer B：     50ml × 1    

3、Buffer C：     50ml × 1    

4、Buffer D：     50ml × 1    

5、消化液I：     1.5ml × 1   

6、消化液II：    1.5ml × 1 

7、消化液III：   1.5ml × 1   

  

 

三、使用方法

注意：

使用前请认真阅读说明书。
本试剂盒供用于5次组织源性原代细胞分离，每次分离组织约1g。
新鲜配制 Buffer B，实验前将消化液I、II、III放入Buffer B中。

       

1、取组织重约1g，放入无菌培养皿中，用1 × PBS（pH7.4）清洗组织，充分去除组织表面的血渍和其它异物。 
2、将清洗组织移至另一无菌培养皿，去除多余组织如脂肪或坏死组织，用无菌刀或剪刀将组织切成1mm³小块组织。
3、将小块组织移至50ml的无菌离心管中，放置10分钟，小块组织沉淀后，弃除多余液体。

4、加入10ml Buffer A到50ml的无菌离心管，再次清洗小组织，充分混匀，300g离心5分钟，弃上清。
5、加入10ml Buffer B到50ml的无菌离心管 ，置于37^oC恒温水浴振荡器中，100转/分摇动20分钟。 
6、取上清到50ml离心管中，加入10ml Buffer C。
7、离心，500g，5分钟，弃上清。 
8、取10ml Buffer D悬浮细胞。
9、进行细胞培养，每隔2-4天更换一次原代细胞培养体系，定期观察细胞生长情况。
 

 

试剂盒仅可用于科研。