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产品简介
购买须知
sgRNA-Puro病毒载体是慢病毒系统质粒，可直接转染或通过包装病毒感染细胞。该质粒含有gRNA骨架结构及Puro抗性标记基因，客户自行插入靶基因的特定sgRNA序列后，与spCas9共同作用，达到基因编辑的目的。
本产品通过冰盒运输，到货后请立即放入-20℃冰箱保存。
产品信息：
| 产品名称 | sgRNA-Puro病毒载体 |
| 载体大小 | 9 kb |
| sgRNA克隆位点 | Esp3 Ⅰ |
| Esp3 Ⅰ酶切后片段大小 | 2 kb+7 kb |
| 产品规格 | 10 μg/支 |
载体示意图：
请详细阅读使用说明后再开始相关实验。
1.从-20℃冰箱中取出sgRNA-Puro病毒载体，4℃融化；
2.按下表配置酶切反应液
| 样品 | 使用量 |
| sgRNA-Puro | 1 μg |
| FastDigest Esp3 I（货号：FD0454，Thermo） | 0.5 μl |
| 10×Buffer | 2 μl |
| DEPC H2O | Up to 20 μl |
3.37℃，酶切0.5 h；
4.终止酶切反应液，将反应液加到1%琼脂糖凝胶孔，跑胶30 min，回收7 kb片段，与退火获得的sgRNA靶向序列做连接反应；
5.连接产物通过转化获得阳性克隆，测序成功后经过质粒抽提即可使用。