产品名称 | Cat log # | 规格 | 储存条件 |
小鼠稳态树突状细胞培养试剂盒 | CS-20001-100 | 1 kit | |
小鼠稳态树突状细胞基础培养基 | CS-20001-B | 100ml | 4oC |
小鼠稳态树突状细胞补充因子 | CS-20001-S | 1ml | -20oC |
预筛选树突状细胞专用胎牛血清 | CS-DCF-10 | 10ml | -20oC |
1.在4度冰箱解冻补充因子和胎牛血清,混匀后使用。
2.将1体积的补充因子和10体积的血清加入到89体积的基础培养基中,充分混匀,得到小鼠稳态树突状细胞完全培养基。如取100ul补充因子和1ml血清加入至8.9ml基础培养基,以此类推。
1.使用淋巴细胞分离液从小鼠骨髓总细胞中分离得到骨髓单个核细胞(BM-MNC),计数。
2.D0:使用完全培养基重悬BM-MNC,调整细胞密度至1.5*10^6/ml,按照如下表格所示将细胞铺于培养板:
培养板 | 完全培养基体积 | BM-MNC细胞数/孔 |
24孔板 | 1ml | 1.5*10^6 |
6孔板 | 4ml | 6*10^6 |
3.将培养板置于细胞培养箱,37 oC,5%CO2,静置培养。
4.D3:半量换液。小心从原来的培养板孔中取出一半原有培养基,加入等量新鲜完全培养基。
5.D6:半量换液。同第4步。
6.D10:轻轻吹打细胞,收集悬浮细胞,即为分化成熟的小鼠稳态DC,可进行后续操作和分析。