克氏假单胞菌 Pseudomonas knackmussii
一、菌种简介
1、菌种名称：克氏假单胞菌 Pseudomonas knackmussii
2、分离基物：土壤/椰子树腐烂芯覆土
3、具体用途：研究
二、斜面或平板:
1、拿到安瓿管中平板形式提供的菌种后请及时使用，成置4-15度条件下暂存，一般不超过一周，我们随附的空白平板供您应急.
2、若是多次使用，应制做成甘油管，放置在使-70℃至80℃冰箱或液氮中保藏。
方法见下。
三、冻干管:
1、将安瓿管上部(非样品一端)在酒精灯上先均匀烧均表面，然后再烧灼上部一侧；
2、灭菌水棉球点烧灼部位，出现裂纹后(注意安瓯管不要倒置)；用灭菌镊子敲开:
3.加入液体培养基约100uL(注意管壁可能会很烫，可冷却后再加液)，打匀取少许接种至适宜培养基。
附: -80℃和液氮保藏方法:
(1) 培养:将菌种接种于合适培养基，培养基用固体或液体均可，对生长较快(如大部分弧菌、希瓦氏菌)和生长较慢的菌株用液体培养基培养比较好。培养时期掌握在对数生长期或对数生长后期。
(2)收集菌体:液体培养时，离心弃去上清液；以平板或斜面培养时，刮取菌体。
(3)保护剂:20%甘油(或20%甘油+5%海藻糖保藏效果更好)灭菌。
(4)分装:将菌体与保护剂混匀，菌体用量不能太少，混匀后看上去要浑浊；分装到若干冻存管。
(5)降温:及时放冰箱，先放-20℃，1-2小时后转移至-70℃至-80℃。如放入液氨中保藏，须注意样品温度降至-40℃以下再放。
(6)活化: 从冰箱或液氮中取出甘油管后，立即放置在40C温水中摇晃使冰融化，约需50秒-100秒；吸取适量内容物至适宜培养基培养。
*也可从冰箱或液氮中取出后，用低温冰盒保温，牙签刮取少许冰接种至合适培养基，甘油管可再放回原处低温保藏(注意动作要快避免过度升温)。
四、常用培养基
1、培养基名称: 2216
Peptone（蛋白胨）5.0g Yeast Extract（酵母浸粉）1.0g Ferric Citrate（柠檬酸铁）0.1g Sodium Chloride（氯化钠）19.45g Magnesium Chloride（氯化镁） 8.8g Sodium Sulfate（硫酸钠）3.24g Calcium Chloride（氯化钙）1.8g Potassium Chloride(氯化钾) 0.55g Sodium Bicarbonate(碳酸氢钠)0.16g Potassium Bromide（溴化钾）0.08g Strontium Chloride（氯化锶)34.0mg Boric Acid（硼酸）22.0mg Sodium Silicate（硅酸钠）4.0mg Sodium Fluoride（氟化钠）2.4mg
Ammonium Nitrate(硝酸铵）1.6mg Disodium Phosphate(磷酸氢二钠)8mg Agar（琼脂）15.0g pH7.6±0.2 （25℃）
称取本品55.2g于1L蒸馏水或去离子水中，煮沸溶解，分装，121℃高压灭菌15分钟,灭菌结束后请摇匀,备用 。
本品因含大量可致沉淀离子而有少量不溶物.
