简介：
类黄酮(Flavonoids)是植物重要的一类次生代谢产物，它以结合态（黄酮苷）或自由态（黄酮苷元）形式存在于水果、蔬菜、豆类和茶叶等许多食源性植物中。槲皮素(Quercetin)是最典型的类黄酮，其在C3位羟基上结合糖分子即形成植物中普遍的成分—芸香苷(Flavonoids)。柑橘属的多种水果均含有大量的黄酮化合物，如橘红素(Tangeretin)和川陈皮素(Nobiletin)，大豆中含有一种异黄酮化合物—大豆异黄酮，茶叶中的茶多酚是由没食子酸和类黄酮—儿茶酚组成。
Leagene 植物类黄酮检测试剂盒(微板法)检测原理是类黄酮溶于有机溶剂，以有机溶剂粗提类黄酮，根据提取液的吸收光谱特性，可利用酶标仪在特定波长处测定其吸光度，通过与标准曲线比较，计算出类黄酮含量。该试剂盒主要用于植物组织或果实中类黄酮的提取以及定量检测类黄酮含量。该试盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
编号 名称 | TP1113 100T | Storage |
试剂(A): Flavonoids标准(1mg/ml) | 1.5ml | 4℃ 避光 |
试剂(B): Flavonoids Assay buffer | 2×500ml | RT 避光 |
使用说明书 | 1份 | |
自备材料：
实验材料：桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织
研钵或匀浆器
滤纸或纱布
6、酶标仪
操作步骤(仅供参考)：
类黄酮提取：
①取果实或其他植物组织，洗净，擦干，称取剪碎的新鲜样品，置于预冷的研钵或匀浆器。
②加入预冷的lavonoids Assay buffer，充分研磨或匀浆后转入l离心管中。用Flavonoids Assay buffer冲洗研钵或匀浆器并转移至离心管中，补加Flavonoids Assay buffer至8ml。
③避光静置，期间摇动，然后过滤至离心管中，滤液即为类黄酮粗提液。
稀释Flavonoids标准溶液：取适量的Flavonoids标准(1mg/ml)，按下表进行稀释：
加入物(μl) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
Flavonoids标准(1mg/ml) | 30 | 60 | 90 | 120 | 150 | 300 |
蒸馏水 | 270 | 240 | 210 | 180 | 150 | 0 |
Flavonoids浓度(mg/ml) | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 | 1 |
加样：按照下表设置空白孔、对照孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡，小心混匀。如果样品中的类黄酮活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置平行孔，求平均值。
加入物(μl) | 空白孔 | 标准孔 | 测定孔 |
Flavonoids Assay buffer | 200 | — | — |
系列Flavonoids标准(1-6号孔) | — | 200 | — |
类黄酮粗提液 | — | — | 200 |
测定：以酶标仪，以空白调零，测定系列标准孔、测定孔在吸光度。
计算：
以1-6号管系列Flavonoids标准浓度(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，直接计算直线回归方程。
组织样品的类黄酮(mg/g)={C×VT}/(W×V1)
式中：C=根据标准曲线求得的测定孔Flavonoids含量(mg/ml)
VT=类黄酮粗提液总体积(ml)=8
V1=加样时所用类黄酮粗提液的体积(ml)=0.2
W=样品鲜重(g)
液体样品的类黄酮(mg/ml)=C×N/V
式中：C=根据标准曲线求得的测定孔Flavonoids含量(mg/ml)
V=加样时所用类黄酮粗提液的体积(ml)=0.2
N=稀释倍数
注意事项：
为了避免类黄酮见光分解，操作时应尽量避光，研磨或匀浆时应尽量缩短时间。
取样量、试剂用量应根据类黄酮含量适当调整。
Flavonoids Assay buffer应密闭避光保存，避免有效成分挥发。
如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但应考虑分光光度计的最小检测体积。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
